بررسی بعضی از ویژگیهای گلوکوزیدازهای گوارشی سوسک برگ خوار سیب زمینی leptinotarsa decemlineata

سوسک کلرادو مهمترین آفتی است که تولید سیب زمینی در ایران و جهان را به طور جدی تهدید می کند. جمعیت کنترل نشده این حشره می تواند به طور کامل گیاه سیب زمینی را بی برگ نموده و موجب کاهش شدید راندمان محصول شود. بنابراین با توجه به زیان آفت، مطالعه آنزیم های گوارشی آن امری ضروری است. هدف از تحقیق حاضر بررسی برخی از ویژگی های بیوشیمیایی آنزیم های آلفا و بتاگلوکوزیداز موجود در معده میانی سوسک برگ خوار سیب زمینی به منظور درک بهتر فیزیولوژی گوارش آنهاست. گلوکوزیدازها آنزیم-هایی هستند که نقش مهمی در گوارش نهایی کربوهیدرات های موجود در رژیم غذایی حشرات را برعهده دارند. با توجه به نتایج به دست آمده در این تحقیق میزان فعالیت ویژه ی آنزیم آلفاگلوکوزیداز با استفاده از سوبسترای اختصاصی پارانیتروفنل آلفا دی گلوکوپیرانوزید در معده میانی سنین سوم و چهارم لاروی و حشرات کامل آفت به ترتیب u/mg 29/3، u/mg 14/5 و u/mg48/6 بود. میزان این فعالیت برای آنزیم بتاگلوکوزیداز با استفاده از سوبسترای اختصاصی پارانیتروفنل بتا دی گلوکوپیرانوزید درمعده میانی سنین سوم و چهارم لاروی و حشرات کامل سوسک برگ خوار سیب زمینی به ترتیب u/mg59/4، u/mg 48/5 و u/mg 68/6 بود. در دامنهph بین 8-2 مناسبترین ph برای فعالیت آنزیم آلفاگلوکوزیداز در سنین سوم و چهارم لاروی 4 و در حشرات کامل 5/4 بدست آمد. این در حالی است که مناسبترین ph برای فعالیت آنزیم بتاگلوکوزیداز معده میانی در محدوده ph بین 5/5-4 بود. هر دوی این آنزیم ها بین 8-3 ph به مدت 2 و 8 ساعت پایداری مناسبی داشتند. در دمای 70-5 درجه ی سلسیوس مناسبترین دما برای فعالیت آنزیم آلفا و بتاگلوکوزیداز به ترتیب 45 و 50 درجه ی سلسیوس اندازه گیری شد. در این تحقیق همچنین میزان پایداری آنزیم ها در 3 دمای 5 ، 26 و 50 درجه ی سلسیوس به مدت 8 روز مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج این بررسی نشان داد که در دمای 50 درجه ی سلسیوس پایداری هر دوی این آنزیم ها درطول هشت روز کاهش یافته است. درآزمایش دیگری اثر برخی ترکیبات بر فعالیت این آنزیم ها مورد ارزیابی قرار گرفت. داده های حاصل نشان داد که ترکیبات منیزیم کلراید، تریس و اوره اثر بازدارندگی متوسط و ترکیب سدیم دودسیل سولفات اثر بازدرندگی شدیدی بر فعالیت این آنزیم ها داشتند. افزایش غلظت های مختلف کلسیم کلراید فعالیت آلفاگلوکوزیداز معده میانی را افزایش داد در حالیکه همین غلظت ها سبب کاهش فعالیت بتاگلوکوزیداز شد. مطالعات بیوشیمیایی بر روی این آنزیم ها نشان داد که در معده میانی سوسک برگ خوار سیب زمینی آنزیم های آلفا و بتاگلوکوزیداز به ترتیب دارای یک و سه ایزوفرم می باشند.